本試劑為國家標(biāo)準(zhǔn)快速檢驗(yàn)方法GB/T5009.199-2003的配套試劑。酶活性和對(duì)農(nóng)藥的靈敏度指標(biāo)均達(dá)到或超過了國家標(biāo)準(zhǔn)要求，可以在各種型號(hào)的農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀(分光光度法)上使用，具有穩(wěn)定性好、靈敏度高和使用方便等特點(diǎn)。

產(chǎn)品型號(hào)：

更新時(shí)間：2015-07-06

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產(chǎn)品分類

PRODUCT CLASSIFICATION

急性中毒快速檢測(cè)類

過氧化氫快速檢測(cè)類農(nóng)藥殘留速測(cè)卡農(nóng)藥測(cè)定浸提液（固體）農(nóng)藥殘留速測(cè)光度計(jì)通用酶試劑 * *對(duì)照液（乙酸乙酯介質(zhì)）敵鼠鈉鹽速測(cè)包敵鼠鈉鹽對(duì)照品安妥檢測(cè)試紙（鼠藥）亞硝酸鹽NaNO2對(duì)照液甲醇速測(cè)試劑盒甲醇對(duì)照液乙醇對(duì)照液（與酒醇速測(cè)儀配套使用）砷、銻、鉍、汞、銀化物檢測(cè)試劑重金屬砷快速檢測(cè)試劑盒砷對(duì)照液重金屬汞快速檢測(cè)試劑盒汞對(duì)照液食物中鋇速測(cè)試劑包重金屬鉛速測(cè)試劑包/盒食用油酸價(jià)、過氧化值速測(cè)試紙桐油鑒別試劑桐油對(duì)照品大嘛油鑒別試劑巴豆油鑒別試液礦物油鑒別試劑蓖麻油鑒別試劑生熟豆?jié){速測(cè)試劑有毒豆角速測(cè)試劑盒

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本試劑為國家標(biāo)準(zhǔn)快速檢驗(yàn)方法GB/T5009.199-2003的配套試劑。酶活性和對(duì)農(nóng)藥的靈敏度指標(biāo)均達(dá)到或超過了國家標(biāo)準(zhǔn)要求，可以在各種型號(hào)的農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀（分光光度法）上使用，具有穩(wěn)定性好、靈敏度高和使用方便等特點(diǎn)。
一、試劑配制
1. 緩沖液試劑：整包倒入大燒杯中，加1000mL純凈水溶解，酸堿度為pH8.0，常溫保存；
2. 乙酰膽堿酯酶：取一支酶粉加20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存，一周內(nèi)用完。也可將溶解后的酶液分成幾個(gè)小瓶，將其冷凍，用時(shí)融化，但不能重復(fù)多次冷凍、化解。
3. 顯色劑：取一支顯色劑加入20mL緩沖溶液，避光保存；
4. 底物：取一支底物加20mL緩沖溶液，搖勻后置4℃冰箱中保存；
二、分析步驟
1. 樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取樣品1g，（非葉菜類取2g）放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩沖溶液，手搖振蕩1～2分鐘，或超聲波振蕩30秒鐘，倒出提取液，靜置3~5min，待用。
2. 對(duì)照溶液測(cè)試：先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑，再加入2.5mL緩沖溶液，搖勻后于37°C放置15min，加入100微升底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄初始吸光度A₁和反應(yīng)3 min時(shí)的吸光度A₂，A₂-A₁=DA₀。
3. 樣品溶液測(cè)試：先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑，再加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同，記錄初始吸光度A₁和反應(yīng)3 min時(shí)的吸光度A₂，A₂-A₁=DA_t。
三、結(jié)果計(jì)算
結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
抑制率（%）=[ （DA₀-DA_t）/ DA₀]×100
當(dāng)蔬菜樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果。陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。
對(duì)陽性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
四、注意
1. 每批樣品的控制時(shí)間、溫度條件必須與對(duì)照溶液的條件**。
2. 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí)，不要剪的太碎。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜，也不要剪的太碎。
3. 當(dāng)溫度條件低于37°C，酶反應(yīng)的速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑后放置反應(yīng)的時(shí)間應(yīng)相對(duì)延長(zhǎng)，延長(zhǎng)時(shí)間的確定，應(yīng)以膽堿酯酶對(duì)照溶液測(cè)試得到的吸光度A₂-A₁≥ 0.3以上，即可往下操作。當(dāng)對(duì)照溶液酶液的加入量大一些時(shí)，也可使A₂-A₁≥0.3以上。
4. 當(dāng)吸光度大到無法讀取時(shí)，說明測(cè)定液渾濁有干擾。
五、產(chǎn)品有關(guān)技術(shù)指標(biāo)
1. 代表性農(nóng)藥的檢出下限見下表

農(nóng)藥名稱

檢出限mg/kg

標(biāo)準(zhǔn)要求檢出限mg/kg

甲胺磷

0.65

2.0

氧化樂果

0.5

0.8

敵敵畏

0.01

0.1

呋南丹

0.01

0.3

2. 乙酰膽堿酯酶的活性：（室溫20°C以上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)）DA₀≥0.3。
六、包裝及保存條件
每包可做200份樣品，0°C以下冰箱冷凍保質(zhì)期為三年，配成試劑后保存期為一周